Flera enzymer som vanligtvis används i PCR-experiment

Polymeraskedjereaktion, förkortad somPCRpå engelska, är en molekylärbiologisk teknik som används för att amplifiera specifika DNA-fragment.Det kan betraktas som en speciell DNA-replikation utanför kroppen, som kraftigt kan öka en mycket liten mängd DNA.Under helaPCRreaktionsprocessen spelar en klass av ämnen en viktig roll – enzymer.

1. Taq DNA

I experiment i början avPCR, forskare använde Escherichia coli DNA-polymeras I, Men det finns ett problem med detta enzym: det behöver fylla på nytt enzym varje gång en cykel utförs, vilket gör operationsstegen något komplicerade och det är svårt att helt automatiskt amplifiera.Detta problem löstes efter att forskare av misstag isolerade Taq DNA-polymeras från Thermus aquaticus 1988. Sedan dess har den automatiska amplifieringen av DNA blivit verklighet.Upptäckten av detta enzym gör ocksåPCRteknologi en bekväm, praktisk och universell teknik.För närvarande är Taq DNA-polymeras det vanligaste polymeraset i DNA-kit.

2. PfuDNA

Som nämnts ovan har Taq DNase en stor bugg, så forskare har modifierat Taq DNA-polymeras i viss utsträckning för att undvika ospecifik amplifiering på grund av felmatchning, vilket resulterar i felaktiga testresultat.Men modifieringen av Taq DNA-polymeras kan hämma aktiviteten av DNA-polymeras vid rumstemperatur.PfuDNA-polymeras kan mycket väl kompensera för ovanstående nackdelar med Taq DNA-polymeras, så att PCR-reaktionen kan utföras normalt och framgångshastigheten för målgenamplifiering effektivt kan förbättras.

3. Omvänt transkriptas

Omvänt transkriptas upptäcktes 1970. Detta enzym använder RNA som mall, dNTP som substrat, följer principen för basparning och syntetiserar en DNA-enkelsträng som är komplementär till RNA-mallen i 5′-3′-riktningen.Omvänt transkriptas är primärt beroende av DNA-polymerasaktivitet från DNA- eller RNA-mallar och har därför ingen 3'-5' exonukleasaktivitet.Det har emellertid RNase H-aktivitet, vilket begränsar synteslängden av omvänt transkriptas i viss utsträckning.På grund av den låga troheten och termostabiliteten hos vilda omvänt transkriptas, modifierade forskare det också.

FörPCRexperiment, är de huvudsakliga förbrukningsvarorna: individuella PCR-rör, 4/8-strips PCR-rör, PCR-plattor.

LabiosPCR förbrukningsvarorhar följandefördelar:

PCR-plattor: Bred termisk cyklerkompatibilitet;Högkontrast, enkel brunnsidentifiering;väl fluorescerande reflektion;bravärmeöverföring;Certifierad DNas, RNase, DNA, PCR-hämmare och testad pyrogenfri.

Enskilda PCR-rör: Avdunstningsbeständig; bravärmeöverföring;utmärkt optisk klarhet; Certifierad DNas, RNase, DNA, PCR-hämmare och testad pyrogenfri.

4/8-rems PCR-rör: Ultratunna väggar;hög klarhet;bra fluorescensreflektion;kan användas inom läkemedelsindustrin, livsmedelsindustrin och molekylärbiologi; högkvalitativt jungfruligt PP-material; certifierat DNas, RNas, DNA, PCR-hämmare och testat pyrogenfritt.